菌种保藏冰箱的温度要求
菌种保藏冰箱的温度要求因保藏方法和菌种类型而异,需根据具体需求选择合适的温度条件。以下是常见的菌种保藏方法及对应的温度要求:
一、短期保藏(1-6个月)
冷藏法(4℃冰箱)
菌种接种于斜面培养基,4℃冷藏。
需定期传代(每月1次),防止菌种退化。
适用范围:常用实验室菌种短期保存。
温度要求:4℃±2℃。
操作要点:
液体石蜡覆盖法
斜面培养基覆盖无菌液体石蜡,隔绝空气。
存放于4℃冰箱,保存期可延长至6个月。
适用范围:需减少水分蒸发的菌种。
温度要求:4℃±2℃。
操作要点:
二、中期保藏(6个月-2年)
冷冻干燥法(冻干管)
菌液与保护剂混合后冷冻干燥,真空封装。
保存期可达2-5年,甚至更久。
适用范围:需长期稳定保存的菌种。
温度要求:冻干后常温或4℃保存。
操作要点:
-20℃冰箱冷冻法
菌液与甘油(15%-20%)混合,分装后冷冻。
保存期1-2年,需定期复苏检查活性。
适用范围:实验室常用菌种中期保存。
温度要求:-20℃±2℃。
操作要点:
三、长期保藏(5年以上)
-80℃超低温冰箱冷冻法
菌液与甘油(15%-20%)混合,分装后冷冻。
保存期5年以上,需定期复苏检查活性。
适用范围:需长期保存的珍贵菌种。
温度要求:-80℃±5℃。
操作要点:
液氮冷冻法(-196℃)
菌液与保护剂混合后,直接投入液氮罐。
保存期理论上无限,但需专业设备维护。
适用范围:需超长期保存的菌种。
温度要求:-196℃。
操作要点:
四、不同菌种的特殊要求
细菌(如大肠杆菌) | 甘油冷冻法(-20℃/-80℃) | -20℃或-80℃ |
真菌(如酵母菌) | 斜面冷藏法(4℃) | 4℃ |
放线菌 | 甘油冷冻法(-80℃) | -80℃ |
噬菌体 | 甘油冷冻法(-80℃) | -80℃ |
特殊菌种(如支原体) | 液氮冷冻法(-196℃) | -196℃ |
五、注意事项
温度稳定性:冰箱温度波动需控制在±2℃以内,避免影响菌种活性。
复苏操作:
冷冻菌种需缓慢解冻(37℃水浴或室温),避免快速升温导致细胞损伤。
解冻后立即接种至新鲜培养基,不可重复冻融。
定期检查:
冷藏菌种需每月检查生长情况,冷冻菌种需每6-12个月复苏一次,确保活性。
记录管理:
详细记录菌种名称、保藏方法、保藏日期、复苏日期及结果,便于追溯。
六、总结
短期保藏:4℃冷藏,适用于实验室日常使用。
中期保藏:-20℃或-80℃冷冻,适用于一般菌种保存。
长期保藏:-80℃或液氮冷冻,适用于珍贵菌种或长期研究。
根据菌种特性和保存需求选择合适的温度条件,是确保菌种活性和稳定性的关键。
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