菌种保藏温度要求

菌种保藏的温度要求因菌种类型及保藏方法而异，需根据具体需求选择适宜的温度范围。以下是不同菌种和保藏方法对应的温度要求：

一、不同菌种的保藏温度

1. 一般菌种

• 低温保藏：大多数菌种在 4℃ 低温下可短期保存，需定期传代以维持活性。

• 超低温保藏：对于需长期保存的菌种，推荐在 -70℃至-80℃ 超低温下保存，可显著延长存活时间。

2. 特殊菌种

• 嗜热菌：需在 37℃ 条件下保存，如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等。

• 无芽孢厌氧菌：在 -20℃ 低温下保藏效果较好，但需注意避免反复冻融。

二、不同保藏方法的温度要求

1. 斜面低温保藏法

• 将菌种接种于斜面培养基，置于 4℃ 冰箱中保存，每3-6个月需重新传代。

2. 液体石蜡保藏法

• 在斜面培养物表面覆盖无菌液体石蜡，置于 4℃至10℃ 干燥处保存，适用于霉菌、放线菌等。

3. 甘油保藏法

• 将菌种悬浮于含 10%-15%甘油 的溶液中，置于 -70℃至-80℃ 超低温冰箱保存，适用于基因工程菌种。

4. 冷冻干燥保藏法

• 菌种经预冻后，在真空条件下升华水分，终在 常温或4℃ 下避光保存，保藏期可达数年至数十年。

5. 液氮保藏法

• 将菌种悬浮于保护剂中，置于 -196℃ 液氮中保存，适用于大多数微生物的长期保藏。

三、温度控制注意事项

1. 温度稳定性

• 保藏温度需保持稳定，波动范围应控制在 ±2℃ 以内，避免温度变化导致菌种损伤。

2. 解冻与复苏

• 超低温或液氮保藏的菌种需快速解冻，通常在 37℃ 水浴中融化，避免缓慢解冻导致细胞损伤。

3. 避免反复冻融

• 菌种解冻后应尽快使用，避免多次冻融，否则会显著降低菌种存活率。

四、保藏温度与菌种存活率的关系

五、保藏温度选择建议

1. 短期保藏：优先选择 4℃ 低温保藏，操作简便，成本低。

2. 中期保藏：推荐使用 -20℃ 或 -70℃至-80℃ 超低温保藏，保藏期较长。

3. 长期保藏：建议采用 液氮保藏法 或 冷冻干燥保藏法，确保菌种存活率和稳定性。

通过合理选择保藏温度和方法，可有效延长菌种的保存时间，维持其遗传稳定性和活性。