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菌种保藏冰箱的温度要求

发布时间: 2025-04-22

菌种保藏冰箱的温度要求因保藏方法和菌种类型而异,需根据具体需求选择合适的温度条件。以下是常见的菌种保藏方法及对应的温度要求:

一、短期保藏(1-6个月)

  1. 冷藏法(4℃冰箱)

    • 菌种接种于斜面培养基,4℃冷藏。

    • 需定期传代(每月1次),防止菌种退化。

    • 适用范围:常用实验室菌种短期保存。

    • 温度要求:4℃±2℃。

    • 操作要点:

  2. 液体石蜡覆盖法

    • 斜面培养基覆盖无菌液体石蜡,隔绝空气。

    • 存放于4℃冰箱,保存期可延长至6个月。

    • 适用范围:需减少水分蒸发的菌种。

    • 温度要求:4℃±2℃。

    • 操作要点:

二、中期保藏(6个月-2年)

  1. 冷冻干燥法(冻干管)

    • 菌液与保护剂混合后冷冻干燥,真空封装。

    • 保存期可达2-5年,甚至更久。

    • 适用范围:需长期稳定保存的菌种。

    • 温度要求:冻干后常温或4℃保存。

    • 操作要点:

  2. -20℃冰箱冷冻法

    • 菌液与甘油(15%-20%)混合,分装后冷冻。

    • 保存期1-2年,需定期复苏检查活性。

    • 适用范围:实验室常用菌种中期保存。

    • 温度要求:-20℃±2℃。

    • 操作要点:

三、长期保藏(5年以上)

  1. -80℃超低温冰箱冷冻法

    • 菌液与甘油(15%-20%)混合,分装后冷冻。

    • 保存期5年以上,需定期复苏检查活性。

    • 适用范围:需长期保存的珍贵菌种。

    • 温度要求:-80℃±5℃。

    • 操作要点:

  2. 液氮冷冻法(-196℃)

    • 菌液与保护剂混合后,直接投入液氮罐。

    • 保存期理论上无限,但需专业设备维护。

    • 适用范围:需超长期保存的菌种。

    • 温度要求:-196℃。

    • 操作要点:

四、不同菌种的特殊要求


菌种类型推荐保藏方法温度要求
细菌(如大肠杆菌)甘油冷冻法(-20℃/-80℃)-20℃或-80℃
真菌(如酵母菌)斜面冷藏法(4℃)4℃
放线菌甘油冷冻法(-80℃)-80℃
噬菌体甘油冷冻法(-80℃)-80℃
特殊菌种(如支原体)液氮冷冻法(-196℃)-196℃


五、注意事项

  1. 温度稳定性:冰箱温度波动需控制在±2℃以内,避免影响菌种活性。

  2. 复苏操作:

    • 冷冻菌种需缓慢解冻(37℃水浴或室温),避免快速升温导致细胞损伤。

    • 解冻后立即接种至新鲜培养基,不可重复冻融。

  3. 定期检查:

    • 冷藏菌种需每月检查生长情况,冷冻菌种需每6-12个月复苏一次,确保活性。

  4. 记录管理:

    • 详细记录菌种名称、保藏方法、保藏日期、复苏日期及结果,便于追溯。

六、总结

  • 短期保藏:4℃冷藏,适用于实验室日常使用。

  • 中期保藏:-20℃或-80℃冷冻,适用于一般菌种保存。

  • 长期保藏:-80℃或液氮冷冻,适用于珍贵菌种或长期研究。

根据菌种特性和保存需求选择合适的温度条件,是确保菌种活性和稳定性的关键。

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